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教你玩轉(zhuǎn)液相色譜儀

更新時(shí)間:2015-06-17      點(diǎn)擊次數(shù):4232

     液相色譜儀系統(tǒng)主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。對(duì)于整個(gè)系統(tǒng)而言,柱子、泵和檢測器是核心部件同時(shí)也是易出問題的主要部位。

    作為一種高精密儀器,如果在使用過程中不按照正確操作的話,就容易導(dǎo)致一些問題。其中zui常見的就是柱壓問題、漂移問題、峰型異常問題。 今天泰坦化學(xué)就列出幾個(gè)常見故障現(xiàn)象,并附zui全可能性建議,讓你把故障挨個(gè)排除,重拾  信心,玩轉(zhuǎn)液相色譜不是夢!

   現(xiàn)象1:出現(xiàn)基線不平的現(xiàn)象,后經(jīng)過沖洗正常,后又出現(xiàn)柱塞桿漏液,換了密封圈后正常,接著測樣品時(shí),泵發(fā)出很大的噪音,立即停止泵的運(yùn)行,對(duì)泵進(jìn)行了潤滑后,噪音消失,進(jìn)樣后又發(fā)現(xiàn)出的峰峰高都特別低,又試了幾次zui后竟然什么峰也不出了,為什么?

   建議:

1,檢查液路是否正常,保證流量,密封性都對(duì)的

2,不接柱子進(jìn)純品看看檢測器有沒有響應(yīng),如果沒有就是檢測器出問題了

3,檢查你的樣品是不是正常的

   現(xiàn)象2:液相色譜六合進(jìn)樣器,zui近堵住了,啟動(dòng)泵進(jìn)樣閥就開始漏液,有人說是進(jìn)完樣后沒用甲醇去進(jìn)樣清洗堵掉了,我想知道每次走完樣后是不是需要進(jìn)幾針甲醇去清洗,而漏液什么原因?

  建議:其實(shí)要知道六通閥有沒有堵,你可以在停泵的狀態(tài)下,用有機(jī)相來清洗,如果能夠正常清洗的話,那應(yīng)該沒堵,如果溶劑打不進(jìn)去,那應(yīng)該是堵了,或者你可以看看漏液的地方是不是有螺絲松了。

   現(xiàn)象3:使用液相色譜,將一個(gè)樣品連進(jìn)六針,峰面積差異很大,忽高忽低,這是為什么?

  建議:

1、進(jìn)樣器有的時(shí)候會(huì)出現(xiàn)氣泡,如果此時(shí)連續(xù)進(jìn)一個(gè)樣品就會(huì)出現(xiàn)峰面積忽高忽低,多做幾次purge injector就OK了。

2、用標(biāo)準(zhǔn)品試一下看是不是樣品的問題;然后再看看柱壓柱溫、流速、進(jìn)樣器、氘燈有沒有問題。

3、查看定量環(huán)是否有氣泡

4、進(jìn)樣的六通閥、色譜柱接口、泵至色譜柱接口的管路中是否有泄漏現(xiàn)象

其實(shí),說到底一般是兩種情況,要么是樣品的原因,要么是儀器原因。如果是樣品,建議換一下其他物質(zhì)試一下;如果是儀器原因,可能是進(jìn)樣器、定量環(huán)、比例閥等等問題。

  附常見故障排除方法,不收藏就太虧了:

1、操作過程若發(fā)現(xiàn)壓力很小,則可能管件連接有漏,注意檢查。當(dāng)出現(xiàn)錯(cuò)誤警告(各組件指示燈均為紅色),一般為漏液,其中一個(gè)感應(yīng)器中已有溶劑,漏液故障排除后,擦干,點(diǎn)擊On line操作界面中的Instrument/System Off,然后再點(diǎn)擊操作界面中的Instrument/System On即可。

2、連接柱子與管線時(shí),應(yīng)注意擰緊螺絲的力度,過度用力可導(dǎo)致連接螺絲斷裂。柱接頭處易發(fā)生漏液,可能情況為接頭Fittings中間的管子未和接口處貼緊。不同廠家的管線及色譜柱頭結(jié)構(gòu)有差異,不要混用,必要時(shí)可使用PEEK管及活動(dòng)接頭;

3、操作過程若發(fā)現(xiàn)壓力非常高,則可能管路已堵,應(yīng)先卸下色譜柱,然后用分段排除法檢查,確定何處堵塞后解決。若是保護(hù)柱或色譜柱堵塞,可用小流量流動(dòng)相或以小流量異丙醇沖洗,還可采用小流量反沖的辦法(新柱不提倡),若還是無法通暢,則需換柱;

4、運(yùn)行過程中自動(dòng)停泵,可能為壓力超過上限或流動(dòng)相用完;

5、樣品瓶中樣品較少,自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣針無法到達(dá)液面,可采用調(diào)低進(jìn)樣針進(jìn)樣高度的辦法,注意設(shè)置時(shí)不要使進(jìn)樣針碰到瓶底,微量樣品分析應(yīng)使用微量樣品瓶;

6、自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣針未與樣品瓶瓶口對(duì)準(zhǔn)時(shí),需重新定位。

7、泵壓不穩(wěn)或流量不準(zhǔn),可能為柱塞桿密封圈問題或seal wash墊圈問題,需更換;

8、基線產(chǎn)生不規(guī)則噪聲,可能原因?yàn)橄到y(tǒng)不穩(wěn)定或沒達(dá)到化學(xué)平衡(使其平衡,若用離子對(duì)試劑,在使用使需要足夠的時(shí)間和溶劑體積,色譜柱才能達(dá)到足夠的平衡),流動(dòng)相被污染(更換流動(dòng)相,清洗儲(chǔ)液器、過濾器,沖洗并重新平衡系統(tǒng)),色譜柱被污染(為證明可能的原因更換系統(tǒng)的色譜柱或使用一根同類的被證明性能好的色譜柱),檢測器不穩(wěn)定;

9、短期有規(guī)則的噪聲,可能原因?yàn)楸脡翰环€(wěn)或泵脈沖,調(diào)節(jié)溶劑不適當(dāng)(如兩種溶劑的互溶性問題),泵入口管路松或堵塞,泵太臟,泵柱塞磨損,檢測器不穩(wěn)定;

10、長期有規(guī)則噪聲,可能原因?yàn)槭覝夭环€(wěn)(未使用柱溫箱)或使用柱溫箱不當(dāng);

11、基線漂移,可能原因?yàn)橄到y(tǒng)不穩(wěn)或沒有達(dá)到化學(xué)平衡,室溫不穩(wěn)(未使用柱溫箱),流動(dòng)相污染或分解,柱污染,檢測池泄漏,系統(tǒng)泄漏,固定相流失(另選流動(dòng)相,另選色譜柱),測定的波長選擇錯(cuò)誤(對(duì)溶劑有吸收),樣品組分保留太長(用強(qiáng)度合適的溶劑清洗色譜柱),檢測器不穩(wěn)定;

12、每次進(jìn)樣時(shí)的保留時(shí)間不重復(fù),可能原因?yàn)橄到y(tǒng)不穩(wěn)或未達(dá)到化學(xué)平衡,由于氣泡、各部件磨損等原因引起的泵壓或泵脈沖輸液不穩(wěn)定,進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高平衡被破壞,溶劑配比不合適,柱被污染;

13、無峰,可能原因?yàn)闄z測器選擇錯(cuò)誤,使用錯(cuò)誤的流動(dòng)相,樣品降解;

14、色譜峰比預(yù)計(jì)的小,可能原因?yàn)檫M(jìn)樣體積錯(cuò)誤,檢測器燈故障,進(jìn)樣問題(瓶號(hào)錯(cuò)、進(jìn)樣體積不合適、進(jìn)樣錯(cuò)誤、針頭堵塞);

15、峰變寬,可能原因?yàn)檫M(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高,過濾器、保護(hù)柱入口、柱入口或連接管路有部分堵塞,檢測器時(shí)間常數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤,進(jìn)樣器問題(如閥漏、針頭堵塞或損壞),柱或保護(hù)柱被污染,對(duì)流動(dòng)相來說樣品溶劑太強(qiáng),使用錯(cuò)誤的色譜柱,溫度變化;

16、出現(xiàn)雙峰/肩峰,可能原因?yàn)楸Wo(hù)柱或柱入口部分阻塞,柱或保護(hù)柱被污染,柱性能下降,保護(hù)柱失效,進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高(樣品過載),平衡破壞;

17、前沿峰,可能原因?yàn)檫M(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高(樣品過載),平衡破壞,對(duì)于流動(dòng)相來說樣品溶劑非極性太強(qiáng)(對(duì)于反相柱),柱或保護(hù)柱被污染,柱性能下降,保護(hù)柱失效;

18、脫尾峰,可能原因?yàn)橹虮Wo(hù)柱被污染,柱性能下降,保護(hù)柱失效,進(jìn)樣器問題(如閥漏等),檢測器時(shí)間常數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤;

19、出現(xiàn)鬼峰,可能原因?yàn)榱鲃?dòng)相被污染,樣品預(yù)處理時(shí)產(chǎn)生降解或混入雜質(zhì),先前進(jìn)樣的流出物,樣品定量管清洗不當(dāng),注射器臟,柱被污染,進(jìn)樣裝置被污染,流動(dòng)相中含有穩(wěn)定劑/穩(wěn)定劑變化。水膜和油膜的外殼有標(biāo)示的。

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